Burnos mikozių laboratorinės diagnostikos principai. Laboratorinės mikozės diagnostikos metodai. Serologiniai mikozių diagnostikos metodai

mikroskopija - tai vienas iš pagrindinių mikozių laboratorinės diagnostikos metodų. Šis tyrimas turi būti atliekamas nuo tos dienos, kai maistinėje terpėje pasirodo pirmosios kolonijos. Prieš atliekant mikroskopinį tyrimą, reikia žinoti, ar grybelis yra mieliagrybis, ar pelėsis – pagal išvaizda kolonijos, daigumo tyrimo rezultatai.

Mikroskopuojant pelėsius, atsižvelgiama į grybienos struktūrą (t.y. hifų struktūrines ypatybes, jų spalvą, pertvarą; konidijų ir sporų struktūrines ypatybes, įskaitant konidijų dydį, formą, spalvą; jų ląstelės sienelės struktūrą , pertvara ir kt.)

Pasiruoškite mikroskopijai gimtoji Ir nudažytas narkotikų. Maisto gaminimui nudažytas Vaistinė medžiaga apdorojama įvairiais būdais:

1. DažymasPAS- metodas. PAS metodo naudojimas leidžia nustatyti neutralius polisacharidus mikroorganizmų sienelėse. Neutralūs polisacharidai yra gliukano-manano kompleksas, randamas daugumos eumicetų ląstelės sienelėje.

PAS- reakcijos– vienas iš grybelinės infekcijos audinių formų mikroskopinės diagnostikos metodų. Praktinėse laboratorijose mikroskopinei diagnostikai taikomos įvairios šio metodo modifikacijos: chromo rūgšties oksidacija – Bauerio reakcija; Gridley dažymas.

2. Gram dažymas (modifikuotas Gram-Weigert), siekiant nustatyti susijusius mikroorganizmus.

3. Ziehl-Nielson dažymas, siekiant nustatyti rūgštims atsparius mikroorganizmus. Jei bandoma medžiaga skystis, tada iš jo paruošiamas nedažytas tepinėlis, skirtas mikroskopijai valyti skysčiuose: alkoholio ir glicerino mišinys santykiu 1:1.

Kitas etapas – mikologiniai tyrimai– grybų išskyrimas ir identifikavimas. Panagrinėkime šio etapo ypatybes, priklausomai nuo tiriamos medžiagos.

Mikologiniai tyrimai

Kultūros tyrimai. Kultūros tyrimai grindžiami patogeno išskyrimu iš tiriamos medžiagos. Įvairių rūšių grybų auginimo laikotarpis skiriasi (nuo 2-4 dienų iki 4 savaičių, jei įtariamas dimorfinis grybas, kultūra izoliuojama iki 8 savaičių). Pagrindinės terpės auginimui mikologinėje laboratorijoje yra Sabouraud terpė: Sabouraud dekstrozės agaras (kieta terpė), Sabouraud sultinys (skysta terpė). Siekiant slopinti bakterinės floros augimą, į Sabouraud terpę dedama antibiotikų (chloramfenikolio, gentamicino, rečiau – streptomicino, penicilino). Siekiant slopinti saprofitinių grybų augimą, į terpę pridedama cikloheksimido ir chloramfenikolio. Yra paruoštų terpių su cikloheksimidu ( Mikobiotikas Mikoselis).

Daugumos patogeninių grybų optimalus auginimo režimas yra 30 0 C, 20-25 0 C, rečiau 37 0 C - jei įtariami dimorfiniai grybai. Daugumos grybų inkubacinis laikas yra iki 6 savaičių; jei po šio laiko augimo nepastebėta, tada pateikiamas neigiamas atsakymas. Įtarus dimorfinę mikozę ir neaugant 6 savaites, pasėlis laikomas 8 savaites ir tik po to duodamas neigiamas rezultatas.

Dėl kultūros egzamino diagnostiškai reikšmingas yra:

Pelėsių arba mielių išskyrimas tiriant įprastai sterilią medžiagą;

Dimorfinio grybelio išskyrimas.

Mikologinio tyrimo algoritmas

1. Sukėlėjo grybelinės etiologijos nustatymas (mikroskopija).

2. Nustatykite mieles arba pelėsį:

Klinikinės medžiagos mikroskopija (grybienos buvimas);

Kolonijų pobūdis ant maistinės terpės, augimo greitis (mielių grybai auga 48 val., pelėsiniai grybai auga lėtai).

3. Galutinis grybelio identifikavimas iki rūšies lygio (intraspecifinis) atliekamas naudojant biocheminius tyrimus ir imunologinius metodus. Tiriant biochemines savybes, tiriamas išskirtos kultūros gebėjimas asimiliuotis (auksanograma) ir fermentacija (zigograma). Galima naudoti automatizuotas identifikavimo sistemas (grybų identifikavimo bandymų sistemas).

Oportunistinių grybų išskyrimo etiologinės reikšmės kriterijai

1. Jei vietiniame preparate (saprofitinėje augmenijoje) matomos tik blastosporos, tai laikoma vežimu.

3. Jei blastosporos yra pavienės ir vyrauja pseudomicelis, tai yra gilių organų pažeidimų požymis.

4. Aktyvus blastosporų pumpuravimas yra ūmaus proceso įrodymas.

5. Kiekybinis rezultatų įvertinimas – grybelio išskyrimas nuo skiedimų

10 - išmatos, šlapimas;

10 – skrepliai.

6. Pakartotinis tos pačios rūšies grybų sėjimas

7. Antikūnų prieš išskirtą padermę buvimas.

Gleivinių išskyrų mikologinis tyrimas

1. Medžiagos paruošimas. Surinkus medžiagą nuo gleivinių, tamponas dedamas į 2 ml skystos Sabouraud terpės arba misos agaro, arba MPB, supilto į sterilius mėgintuvėlius. Kruopščiai juos purtykite 5 minutes, atsargiai, kad neįmirktumėte kamščio. Iš gautos suspensijos paruošiama eilė skiedimų santykiu 1:10 ir 1:100 ir kt.

Iš kiekvieno praskiedimo 0,1 ml pasėjama ant 2 puodelių misos agaro, Sabouraud agaro arba MPA. Inokuliacijos ant kietos terpės ir mėgintuvėlio su skysta terpe su tamponu sodrinti inkubuojami +37 0 C temperatūroje 48 valandas:

Pasibaigus laikui, pasėliai apžiūrimi ir suskaičiuojamas kolonijų skaičius bei apytiksliai nustatomas mielių kolonijų skaičius. Jų skaičius padauginamas iš 20 ir skiedimo, iš kurio sėjama;

Jei lėkštelėse su inokuliacija, pagaminta iš skiedimų, neauga, iš sodrinimo terpės pakartotinai pasėjama į lėkštelę su misos agaru.

Mikologinis kraujo tyrimas

1. Medžiagos paruošimas. Po kraujo paėmimo jis skiedžiamas santykiu 1:10, kad baktericidinės kraujo savybės neslopintų grybelių augimo.

2. Kultūros egzaminas.

5-10 ml kraujo pasėjama 50-100 ml skystos Sabouraud terpės su 2% gliukozės. 37 0 C temperatūroje jie inkubuojami savaitę;

Po 5 dienų atliekama kontrolinė sėja. Norėdami tai padaryti, išimkite nuosėdas sterilia pipete. 3-4 lašai iš pipetės pasėjami ant misos agaro ir sumalami sterilia bakteriologine kilpa;

Sėkliniai puodeliai laikomi termostate 37 0 C temperatūroje 2-5 paras;

Jei aptinkamas augimas, duodamas preliminarus atsakas apie fungemiją ir tolesnis grybelio identifikavimas tyrimo metu.

Mikologinis biopsijos mėginių tyrimas

1. Norėdami rinkti medžiagą, naudokite pirštų atspaudų metodą.

2. Kultūros egzaminas:

Ant Sabouraud tankios maistinės terpės paviršiaus padarykite įspaudą bandomuoju audinio gabalu;

Tas pats audinio gabalas dedamas į 50 ml skystos maistinės terpės (misos arba Sabouraud);

Pasėliai inkubuojami 37 0 C temperatūroje 5 dienas.

Remiantis statistika, apie 20% mūsų šalies gyventojų vienokiu ar kitokiu laipsniu serga mikoze. Tačiau ne visi kreipiasi į profesionalią pagalbą. Viena iš priežasčių – žmonės tiesiog nežino visų šios ligos simptomų ir apraiškų.

Mikozės simptomai

Visų pirma, verta pastebėti, kad tai ne konkreti liga, o grupė įvairių odos ir jos priedų grybelinių infekcijų. Todėl simptomai gali būti gana įvairūs, tačiau dažniausiai pastebimi šie:

• Dribsnių dėmių atsiradimas ant odos. Dažniausiai jie atsiranda tarp pirštų, ant pėdų odos. Jie dažnai sukelia niežulį, dirginimą ir kitus nemalonius pojūčius.
• Nagų spalvos ir struktūros pokyčiai. Jie tampa gelsvi, trapūs, trupa ir pleiskanoja, jų paviršius gali būti nelygus ir nelygus.
• Įtrūkimai odoje. Dažnai, sergant grybelinėmis pėdų odos infekcijomis, ji tampa šiurkšti ir pradeda smarkiai trūkinėti.
• Nemalonus kvapas. Daugelis pacientų skundžiasi dėl nemalonaus pažeistos odos kvapo, ypač dėl pėdų mikozės.

Jei atsiranda tokių požymių, būtina kuo greičiau apsilankyti pas dermatologą ir atlikti išsamią diagnozę, kad nustatytų, kokio tipo mikozė paveikė odą.

Mikozės diagnozavimo metodai

Kai pacientai kreipiasi į dermatologą su būdingais grybelinių odos pažeidimų požymiais, dažniausiai gydytojui diagnozei nustatyti pakanka pirminės išorinės apžiūros. Vienintelis klausimas yra tai, kokio tipo mikozė paveikė odą.

Ši informacija reikalinga norint nustatyti tolesnę gydymo strategiją. Mikozei diagnozuoti gali būti naudojami šie metodai:

• Wood's lempos tyrimas. Specialus ultravioletinių spindulių spektras leidžia nustatyti grybelinių infekcijų buvimą. Šis metodas yra labai paprastas ir prieinamas, jo pagalba galite ne tik nustatyti diagnozę, bet ir stebėti gydymo eigą. Tačiau tai neleidžia mums nustatyti mikozės tipo.
• Mikroskopija. Vienas iš paprasčiausių ir labiausiai paplitusių mikozės diagnostikos metodų – mikroskopu apžiūrėti grybelio paveiktų audinių įbrėžimus. Norėdami tai padaryti, jis dedamas ant stiklinės skaidrės. Yra dviejų tipų grandymo tyrimas: naudojant dažymo priemones ir naudojant šviesinimo priemones.
• Bakteriologinė kultūra. Vienas tiksliausių diagnostikos metodų yra rezervuaro inokuliacija maistinėmis terpėmis. Remdamasis išaugusių grybelio kolonijų išvaizda ir ypatumais, gydytojas gali nustatyti patogeno tipą. Šio metodo trūkumas – kolonijos auginimas gali užtrukti 2–3 savaites. Be to, tik puse atvejų galima gauti rezultatų.
• PGR diagnostika. Tai vienas tiksliausių ir šiuolaikiniai metodai diagnozę, tačiau norint nustatyti mikozės tipą, gali prireikti kelių tyrimų, o tai reikalauja tam tikrų išlaidų.

Verta paminėti, kad norint nustatyti veiksmingiausią šios ligos gydymo būdą, būtina diagnozuoti mikozę. O jei nėra galimybės iš karto apsilankyti pas specialistą, galite pasinaudoti mūsų klinikos teikiama paslauga ir

Remiantis Rusijos Federacijos valstybinio epidemiologinės priežiūros komiteto Maskva, 1996 m. instrukcijomis SP 1.2.036-95 „I-IV patogeniškumo grupių mikroorganizmų registravimo, laikymo, perkėlimo ir transportavimo tvarka“ pagal epidemiologinį pavojų, mielės. ir pelėsiniai grybai, taip pat dermatofitai priklauso III-IV infekcinių ligų sukėlėjų grupėms, todėl dirbant su jais būtina laikytis specialių saugos taisyklių, gamybinės sanitarijos, antiepideminio režimo ir asmens higienos, kad būtų užtikrinta asmeninė higiena. ir visuomeninė infekcijų, alergijos ir infekcijos plitimo prevencija.

Laboratorijoje, skirtoje darbui su III-IV patogeniškumo grupių mikroorganizmais, įrengti lengvai dezinfekuojami baldai, įskaitant spinteles švariems laboratoriniams stikliniams indams, reagentams, auginimo terpėms, atitinkama įranga ir įrankiais. Darbui reikalingos alkoholinės lempos arba dujiniai degikliai, mikrobiologinės kilpos, mikologinės mentelės, mentelės, epiliavimo ir anatominiai pincetai, nagų kirpimo mašinėlės, skalpeliai, žirklės, Volkmann šaukštai, pipetės, Pasteur pipetės, skrodžiamosios adatos, stiklo strypai, švirkštai, mažo greičio centrifuga, kratymo aparatai, Petri lėkštelės, mėgintuvėliai, stikliniai indai, Wood's ultravioletinė lempa su filtru, mikroskopai, šviestuvai, termostatai, autoklavai, šaldytuvai, sauso karščio krosnys, baktericidinės lempos.

Medžiagos paėmimas tyrimams

Mikroskopinė mikozių diagnostika apima grybienos ir sporų aptikimą tiriamoje biomedžiagoje. Epidermio žvynai, plaukai ir nagai laikomi tiriama biomedžiaga. Būtinas reikalavimas prieš atliekant tyrimą yra nebuvimas vietinis gydymas mažiausiai dešimt dienų, o sisteminis gydymas – mėnesį. Atkreipkite dėmesį, kad pacientas naudoja plovikliai(ypač turinčių antiseptikų) gali turėti įtakos tyrimo rezultatų patikimumui, todėl likus 3-4 dienoms iki tyrimo skalbti draudžiama.

Biomedžiagos paėmimo ir vaisto paruošimo priemonės pateiktos paveikslėlyje:

Nuotrauka. Biomedžiagos paėmimo ir vaisto paruošimo instrumentai.

Įtarus lygios odos mikozę, rankų ir pėdų mikozę be nagų plokštelių pažeidimo, tiriamos epidermio žvyneliai nuo pažeidimo paviršiaus. Lygios odos mikozei pageidautina tirti epidermį nuo ribinės pažeidimo zonos, nes patologinis procesas dažnai išnyksta centrinėje zonoje. Tuo pačiu metu neturėtume pamiršti apie galimybę pažeisti vellus plaukus, kurie lemia tolesnės gydymo taktikos pasirinkimą. Plaukai šalinami epiliavimo pincetu. Dėl rankų ir pėdų mikozės, nepažeidžiant nagų plokštelių, tiriamos epidermio žvyneliai iš trečiosios ir ketvirtosios tarppirštinės raukšlės, taip pat iš delnų ir pėdų skliautų.

Jei įtariate grybelinę infekciją ilgi plaukai(galvos oda, barzda, ūsai ir gaktos), taip pat veliūriniai plaukai, jie tiriami mikroskopu. Sergant galvos odos trichofitoze, plaukai lūžta 1-2 mm atstumu virš burnos lygio. plaukų folikulas, o primena kelmus ir taškus. Jei plaukelių nepavyksta sugriebti epiliavimo pincetu, tada juos bandoma pašalinti aštriu skalpelio galu ar pjaustoma adata.

Esant galvos odos mikrosporijai, plaukai nulūžta 5–6 mm aukštyje, primenantys „šienaujamą pievą“. Būtent šie lūžinėjantys plaukai yra tiriami mikroskopu. Plaukai nuo pažeidimų pašalinami pincetu.

Esant favus, tiriami plonėjantys plaukai virš skruosto paviršiaus.

Įtarus onichomikozę, tiriama lengvai susmulkinta medžiaga iš poodinės hiperkeratozės srities, taip pat pačios pakitusios nagų plokštelės.

Būtina suprasti, kad bet kokia tiriamoji medžiaga iš paciento yra potencialiai užkrečiama, todėl jos surinkimas turi būti atliekamas patalpoje, kurioje kasdien atliekamas šlapias valymas naudojant dezinfekavimo priemones (5% chloramino tirpalas, 5% skaidrintas baliklis), ir oras. yra sterilizuojamas ultravioletiniais švitintuvais (tai apima 1-1,5 val. ir patenka į patalpą praėjus 20 minučių po išjungimo). Termostatai kas savaitę nušluostomi 0,5% chloramino tirpalu, sienos apdorojamos dezinfekavimo priemonėmis kartą per mėnesį. Dirbdamas gydytojas turi būti apsaugotas kauke, akiniais, chalatu ir pirštinėmis. Biomedžiagos paėmimo instrumentai, pirštinės, stikleliai ir dengiamieji stikleliai, vienkartinės drapiruotės ir servetėlės ​​po naudojimo dezinfekuojamos 30 minučių panardinant į 1,5 % klindesino-extra tirpalą (5 % fenolio tirpalas arba 5 % lizolio tirpalas). Likusios patologinės medžiagos (plaukų, odos ir nagų žvyneliai) autoklave apdorojami 2 atm. ir 132˚ C 20 minučių (kontrolė – karbamidas) arba 1,5 atm. ir 126˚ C temperatūroje 30 minučių (kontrolė – benzenkarboksirūgštis), arba virkite 1 valandą vandenyje arba 30 minučių 1% muilo-sodos tirpale.

Patologinė medžiaga į laboratoriją vežama specialioje talpykloje arba metalinėse dėžėse, saugant nuo tiesioginių saulės spindulių. Pridedamame dokumente nurodoma paciento pavardė, vardas, patronimas, lytis, amžius ir adresas, numatoma klinikinė diagnozė, tiriamos medžiagos pavadinimas, jos surinkimo laikas, pažeidimo vieta, ligos istorija. numerį, gydytojo ir medžiagą siunčiančios institucijos pavadinimą.

Vaisto paruošimas

Iš pažeidimo paėmus epidermio dribsnius, paruošiamas preparatas mikroskopiniam tyrimui. 1-2 lašai 20% KOH užlašinami ant tiriamosios medžiagos, padėtos ant stiklelio, po to stiklinė kaitinama virš degiklio liepsnos, kol aplink periferiją atsiras balkšvas kristalizuoto šarmo kraštas. Tada mėginys uždengiamas dengiamuoju stikleliu (kuris prispaudžiamas pjaustymo adata) ir tiriamas mikroskopu. Tyrimas turi būti atliktas ne vėliau kaip per 2 valandas po vaisto paruošimo dėl šarminės kristalizacijos galimybės.

Plaukų preparato, kai įtariama grybelinė infekcija, paruošimo būdas atitinka anksčiau aprašytą, tik skirtumas yra tas, kad dangtelis nėra nuspaudžiamas pjaustymo adata (kad nesusitraiškytų plaukai).

Nuotrauka. Išsikristalizavusio šarmo krašto išvaizda.

Vaistui paruošti nupjautų nagų plokštelių gabalėliai panardinami į mėgintuvėlį su 20% KOH ir 1 valandą laikomi termostate (t≈37˚C), o po to gauta želė pavidalo masė perkeliama į stiklinį stiklelį. , uždengtas dengiamuoju stikleliu ir tiriamas mikroskopu.

Skirtingai nuo nagų plokštelių, mėginiai, pagaminti iš lengvai susmulkinamos medžiagos iš ponagio hiperkeratozės zonos, dedami ant stiklinio stiklelio, ant jų užlašinami 1-2 lašai 20% KOH, po to stiklelis kaitinamas virš degiklio liepsnos iki balkšvo krašto. išilgai periferijos atsiranda kristalizuoto šarmo (65 pav.). Tada mėginys uždengiamas dengiamuoju stikleliu, kuris švelniai paspaudžiamas pjaustymo adata ir tiriamas mikroskopu.

Preparato mikroskopija

Mikroskopiniam tyrimui atlikti naudojamas laboratorinis mikroskopas nenaudojant panardinimo. Epidermio žvynų, žvynų iš ponagio hiperkeratozės srities, taip pat ištirpusių nagų plokštelių mikroskopija pirmiausia atliekama mažu padidinimu (×100), o aptikus grybienos siūlus, primenančius „upių žemėlapį“ (geležinkelius). , objektyvas perjungiamas į didesnį padidinimą (×400) . Esant vidutiniam padidinimui, grybiena primena keistos formos stiklo strypus, kurie keičia šviesos lūžio laipsnį dirbant su mikroskopo mikrosraigtu.

Plaukų mėginio mikroskopija atliekama iš karto esant vidutiniam padidinimui (×200 arba ×400). Sergant trichofitoze, didelės sporos, išsidėsčiusios eilėmis, randamos plauko viduje, o sergant mikrosporijomis plauko viduje yra daug smulkių mozaikinių sporų (taigi ir terminas „mikrosporija“). Kartais pastebimas apvalkalo buvimas plauko išorėje - tai būdinga tiek trichofitozei (ektotrikso variantas, sporos didelės), tiek mikrosporijai (šiuo atveju apvalkalą sudaro mažos sporos). Mikroskopuojant pažeistus plaukus su favus, plauko viduje, be apvalių ar daugiakampių sporų sankaupų, randami oro burbuliukai ir grybienos siūlai.

Preparatai turi būti apžiūrėti ne vėliau kaip per 2 valandas nuo jų paruošimo momento dėl šarminės kristalizacijos galimybės. Siekiant padidinti diagnozės patikimumą, iš vieno pažeidimo reikia atlikti kelis preparatus (mažiausiai du). Galimos klaidos mikroskopinėje mikozių diagnostikoje gali būti siejamas tiek su nekokybišku preparatų paruošimu (perkaitimas virš degiklio liepsnos, kurį lydi priešlaikinė šarmo kristalizacija), tiek su nepakankama tyrėjo patirtimi (kai audinių skaidulos atsitiktinai randami preparate, dažnai painiojami su grybienos siūlais).

Turinys

Nustatyti pažeidimą ir nustatyti sukėlėją yra itin sunku, kai grybelis užsikrėtęs pirmosiomis stadijomis. Diagnozę apsunkina tai, kad patologija iš karto nepasireiškia arba turi įvairių simptomų. Ligos sukėlėjui nustatyti paimama biomedžiaga iš patogeninės mikrofloros paveiktos vietos: skreplių, odos dalies, užkrėsto nago, kraujo, limfmazgių ar vidaus organų biopsija.

Kas yra grybelinės ligos

Kaip tai atrodo

Priežastis kreiptis į dermatologą, kaip taisyklė, yra pirmosios patologinės ligos apraiškos. Klinikiniai požymiai skirsis priklausomai nuo infekcijos vietos ir grybelinės ligos sukėlėjo. Išskiriami šie patogeninių mikroorganizmų tipai:

• Candida grybelis – sukelia kandidozės infekcijas;
• Trichophyton (Trichophyton) - provokuoja infekcines nagų, odos, gleivinių patologijas;
• Kriptokokozė – priepuoliai Vidaus organai, plaučiai;
• Aspergiliozė yra grybelinė liga, kurią sukelia susilpnėjęs imunitetas.

Diagnozės metu pagal lokalizaciją galima nustatyti vieną iš 2 infekcijos grupių:

Patogeninė mikroflora prasiskverbia per žaizdas epidermio paviršiuje, ligos priežastis gali būti bet koks įbrėžimas, kuris provokuoja lygios odos mikozę. Kūnas negali susidoroti su patogeno ataka, kai apsaugines funkcijas. Diagnozės metu dažnai nustatoma Trichophyton arba Candida genties infekcija. Pastarieji sukelia šias ligas:

• pienligė;
• kandidozė vyrams;
• kandidozė burnos ertmė.

Ligos sukėlėjų yra daugiau nei keliasdešimt, jie skirstomi pagal audinių pažeidimo būdą. Diagnozės metu galima nustatyti šiuos grybelinių mikroorganizmų tipus:

• gilias sistemines mikozes provokuoja Histoplasma capsulatum;
• poodines poodines mikozes sukelia Sportrichum schenckii;
• epidermomikozė išsivysto dėl Epidermophyton floccosum;
• pityriasis versicolor, paviršinė mikozė - Malassezia furfur;
• oportunistinės grybelinės ligos - Candida albicans.

Mikozių klasifikacija

Bendras visų šio tipo ligų pavadinimas slepia įvairių rūšių grybų žalą žmogaus organizmui. Diagnozuodami odos ligas gydytojai skirsto į 4 grupes:

1. Keratomikozė. Lokalizacijos vieta tampa raginis epidermio sluoksnis kituose odos sluoksniuose nėra uždegiminių reiškinių (piedra, pityriasis versicolor, šašas, sporotrichozė). Šios rūšies patologiją sukelia šie grybai: Sporotrichium, Trichosporon, Piedraia, Exophiala, Pityrosporum.
2. Dermatomikozės. Būdinga tariama uždegiminis procesas, lokalizuota ant odos, galvos odos ir nagų (fausas, trichofitozė, epidermofitozė, mikrosporija). Patologijas provokuoja šios grybų padermės: Epidermophyton, Microsporum, Trichophyton.
3. Kandidozė. Šio tipo grybelis pažeidžia gleivines, odą ir jos priedus. Dažnai Candida genties grybų atakos taikiniu tampa vidaus organai.
4. Gilios mikozės. Jie provokuoja sunkias visų odos sluoksnių, vidaus organų, gleivinių, kaulų, raumenų infekcijas (mukorozę, penicilozę, aspergiliozę).

Yra atskiros pseudomikozės (aktinomikozė, eritrazma), kurios nėra grybelinės ligos, tačiau jų simptomai yra panašūs į tikrų mikozių. Tokiais atvejais būtina diferencinė diagnostika. Diagnozė tokiais atvejais yra labai svarbi, nes padeda nustatyti grybelinės infekcijos tipą arba ją atmesti. Nuo to priklauso gydymo režimo tikslas, trukmė ir veiksmingumas.

Dermatomikozės

Dermatofitų grybai prasiskverbia giliai į odą ir sukelia dermatomikozę, pavyzdžiui, šias žinomas patologijas:

• mikrosporija;
• trichofitozė;
• atleto koja;
• rubrofitija;
• favus.

Šio tipo patologija klasifikuojama kaip įvairios ligos, kurios sukuria randus, rankų, kojų nagų deformaciją, struktūros pokyčius ir plaukų slinkimą. Patogenai paveikia viršutinius, giluminius odos sluoksnius, dėl kurių atsiranda furunkulinių mazgų, pūlingų bėrimų ir didelių uždegimo židinių. Palanki sąlyga vystytis – netinkama pėdų higiena. Pirmiausia grybelis išauga ant pėdų odos, tarpupirščiuose, vėliau plinta į nagus.

Kandidozė

Patogeniniai mikroorganizmai veikia giluminius ir paviršinius odos sluoksnius, plinta į nagus, plaukus, vidaus organus. Ligas sukelia Candida genties grybai, ligos priklauso kandidozės grupei. Išskiriami šie negalavimų tipai:

• apibendrintas;
• paviršutiniškas;
• visceralinis.

Candida grybai klasifikuojami kaip oportunistiniai. Į mieles patogenus galima aptikti diagnostikos metu žarnyne, burnos ertmėje ir sveikas žmogus. Stiprus imunitetas stabdo patogeninių mikroorganizmų plitimą, o jam nusilpus prasideda aktyvus kandidozės dauginimasis, dėl ko pažeidžiama liemens, pėdų, galvos, rankų oda. Klinikiniai pakitimai stebimas sergant visų tipų kandidoze. Gydymas priklauso nuo ligos sunkumo ir pažeidimo tipo.

Gili mikozė

Tai liga, pažeidžianti gilius odos sluoksnius ir vidaus organus. Ligos vystosi stipriai susilpnėjus organizmo apsaugai, keičiantis hormonų lygis, medžiagų apykaitos sutrikimai. Šios patologijos klasifikuojamos kaip gilios mikozės:

• kokcidioidozė;
• chromomikozė;
• rinosporidiozė;
• histoplazmozė;
• sporotrichozė;
• blastomikozė;
• mukorozė;
• cefalosporiozė;
• micetoma;
• kladosporiozė;
• Maduros pėda;
• aspergiliozė.

Keratomikozė

Tai patologijų grupė, kuri lokalizuota tik plaukų odelėse, raginiame sluoksnyje ir paviršiniame odos sluoksnyje. Būdingas keratomikozės požymis yra uždegiminių reiškinių nebuvimas. Ligos sukėlėjai – pelėsiniai, į mieles panašūs grybai, dermatofitai (apie 70 ligų sukėlėjų rūšių). Jie provokuoja šias ligas:

• shimberi;
• pityriasis alba;
• kerpės juodos spalvos;
• imbrikatinė mikozė;
• atogrąžų baltos ir geltonos kerpės;
• mazginė trichosporija;
• piedra;
• pityriasis versicolor (pityriasis versicolor).

Kaip diagnozuoti grybelį

Toliau prasideda vizualinis patikrinimas, kuris padeda nustatyti pažeidimo mastą ir kurios vietos yra paveiktos grybelių. Gydytojas turėtų atkreipti dėmesį į paciento imunodeficito buvimą. Norint nustatyti patogeno tipą, būtina surinkti medžiagą, kuri siunčiama laboratoriniams tyrimams. Patyręs gydytojas gali diagnozuoti pradinio tyrimo metu, tačiau norint sudaryti gydymo schemą, vis tiek reikia ištirti biomedžiagą. Grybelinėms ligoms diagnozuoti naudojami šie metodai:

• mikroskopija - biomedžiagos tyrimas mikroskopu, įprastas ir paprastas diagnostikos metodas;
• apžiūra po Wood's lempa – specialus ultravioletinių spindulių spektras (liuminescencija) padeda pastebėti grybelinius pažeidimus;
• bakteriologinis pasėlis yra tikslus diagnostikos metodas, tačiau kol kolonija išauga ant maistinės terpės, užtrunka 2-3 savaites;
• PGR diagnostika – tiksliausias būdas nustatyti patogeninės mikrofloros tipą, tačiau norint tiksliai diagnozuoti, gali prireikti kelių tyrimų, o tam reikia išleisti pinigus.

Laboratoriniai metodai

Tik laiku atlikta tiksli diagnozė padės paskirti veiksmingą gydymo režimą ir sumažinti kurso trukmę. Laboratorinė diagnostika grybelinių ligų yra daugiausia efektyvus metodas nustatyti patogeno tipą. Identifikavimui naudojamos šios tyrimo galimybės:

• bakteriologinė kultūra;
• histologinė analizė;
• PGR diagnostika;
• imunologiniai tyrimai;
• mikrobiologiniai tyrimai;
• kultūros tyrimai.

Diferencinė mikozių diagnostika

Nustatyti tikslią diagnozę sunku, nes skirtingi tipai atsiranda mikozė įvairūs simptomai. Tokiais atvejais taikomas diferencinės diagnostikos metodas ir mikozė lyginama su kitomis dermatologinėmis patologijomis. Dažnai mikozės požymiai painiojami su žvyneline, tačiau nubraukus žvynus grybelinė patologija nekraujuos. Panašūs simptomai pastebimi sergant parapsoriaze.

Gydytojas turi atmesti galimybę susirgti nummuline egzema. Tai ypatinga patologijos rūšis, kurią galima nustatyti tik laboratorinės diagnostikos būdu. Dažnai grybelio požymiai klaidingai painiojami su polimorfine fotodermatoze, kuri gali išsivystyti tik suaugusiems ir niekada nepasireiškia vaikui. Norint nustatyti tikslią diagnozę ir paskirti kompetentingą gydymą, reikalinga laboratorinė ir diferencinė diagnostika.

Mikrobiologinė mikozių diagnostika

Tai paprasčiausias ir labiausiai paplitęs būdas nustatyti mikozę odoje ir kraujyje. Norint tiksliai diagnozuoti, būtina rinkti medžiagą tyrimams. Jei pažeista galvos oda, reikia pincetu surinkti pažeistus plaukus ir nubraukti pažeistą vietą nuo odos. Laboratoriniai tyrimai grybelinėms ligoms, naudojant mikrobiologinį metodą, jos atliekamos dedant biomedžiagą į 30% kalio hidroksido tirpalą, po to ant stiklelio.

Analizė padės nustatyti, kur yra grybelis (odos, plaukų išorėje arba viduje) ir jo dydį. Jei medžiaga surenkama neteisingai, analizė gali duoti klaidingą rezultatą. Diagnozei nustatyti naudojami šie mikrobiologinės diagnostikos metodai:

• mikroskopija su natūraliais ir nedažytais preparatais;
• mikroskopija su dažytais preparatais.

Tyrimo metodai

Diagnozuodamas specialistas turi atsižvelgti į grybienos sandarą (hifų sandarą, jų pertvarą, spalvą), sporų, kondijų struktūrinius ypatumus, jų spalvą, formą ir dydį, ląstelės sienelės sandarą ir kt. yra atsižvelgiama. Tyrimui ruošiami vietiniai, spalvoti preparatai. Pastariesiems reikalingas medžiagų apdorojimas Skirtingi keliai:

1. PAS dažymas. Šis dažymo būdas padeda nustatyti neutralius polisacharidus mikroorganizmų sienelėse. Tai apima gliukano-manano kompleksą, kuris randamas daugelio eumicetų ląstelės sienelėje. Tai provokuoja dažymo procesą.
2. PAS reakcija. Naudojamas audinių formos grybelinei infekcijai diagnozuoti. Laboratorijoje šiam tyrimui naudojamos įvairios modifikacijos, pavyzdžiui, Gridley dažymas arba Bauerio reakcija.
3. Gramo metodas. Dažymas tokiu būdu padeda nustatyti lydinčių mikroorganizmų buvimą.
4. Ziehl-Nielson dažymas. Padeda nustatyti rūgštims atsparius mikroorganizmus. Jei biomedžiaga yra skysta, tada mikroskopijai paruoškite specialų nedažytą tepinėlį valymo skysčiuose: glicerinas ir alkoholis sumaišomi lygiomis dalimis.

Kultūros testas grybams

Biomedžiaga dedama ant maistinės terpės (auginimo), kad būtų išskirta grynoji kultūra kambario temperatūroje. Dimorfiniai grybai tokiomis sąlygomis formuoja grybieną, kai auga iki 37 laipsnių, pradeda formuotis į mieles panašios ląstelės. Sabouraud terpė naudojama dermatofitams ir Candida grybams nuo pelėsinių (hifalinių) grybų, reikalinga Czapek terpė. Į kompoziciją dažnai pridedamas antibiotikas. Giliosios mikozės gali būti nustatomos tik klinikiniuose laboratoriniuose centruose dėl didelio jų užkrečiamumo.

Grybelinių ligų liuminescencinė diagnostika

Norėdami nustatyti pažeistas odos vietas su Microsporum genties patogenine mikroflora, naudokite ultravioletinė lempa. Tai greitosios diagnostikos galimybė, kuri naudojama, jei reikia patvirtinti odos infekciją ar kerpių ligų simptomus. Ultravioletinė spinduliuotė nėra pagrindinis grybelio nustatymo būdas, tai yra pagalbinis metodas, todėl jis nėra būtinas.

Pacientui tirti naudojama Wood's lempa, jie skleidžia UV spinduliuotę, jų veikiami grybelio atliekos šviečia ryškia šviesa. Spalva priklauso nuo to, kokio tipo patogenas paveikė pacientą:

• žalsvos – galvos kerpės;
• mėlyna – raudonoji vilkligė ant lūpų;
• gelsvi – plokšti kerpių dariniai.

Imunologinis fermentų kraujo tyrimas grybeliui nustatyti

Odą ir vidaus organus pažeidžiančioms mikozėms (histoplazmozei, kokcidioidozei) nustatyti naudojamas imunologinis fermentinis kraujo tyrimas grybelinėms ligoms nustatyti. Šis metodas dažnai naudojamas, jei dėl tam tikrų priežasčių neįmanoma atlikti audinių biopsijos. Metodas pagrįstas antikūnų titro, nukreipto prieš tam tikros rūšies grybelinę ligą, paieška.

Šiems tikslams naudojamas IgG nustatymas aspergiliozei ir kandidozei. Analizės tikslumas yra apie 80%, in retais atvejais prieinama klaidinga teigiamas rezultatas nesant giliųjų mikozių. Taip atsitinka, kai pacientui yra burnos gleivinės grybelis arba pažengusi pienligė. ELISA tyrimas reikalauja veninio kraujo mėginio, paimto anksti ryte arba 4 valandas po paskutinio valgio. Jokio kito pasiruošimo analizei nereikia.

Atsakymas į analizę bus pateiktas praėjus kelioms dienoms po biomedžiagos surinkimo. Retai laukimo laikotarpis viršija 5 dienas. Laboratorijos įrangos kokybė turi įtakos tyrimo greičiui, jei yra priežasčių atlikti papildomą kraujo mėginių tyrimą. Baigus procedūrą, pacientui pateikiama išvada, kurioje bus nurodyta viena iš šių verčių:

• jei patvirtinamas grybelio buvimas, bus rašoma „teigiamas rezultatas“;
• jei nėra visiško tikrumo, kad kraujyje buvo aptiktas grybelis, jie rašo „abejotinas rezultatas“;
• nesant patogeninės mikrofloros biomedžiagos mėginyje rašomas „neigiamas rezultatas“;
• Jei turite gerą įrangą, kraujo tyrimai gali nustatyti mikozės ląstelių koncentraciją ir nurodyti rodiklį.

Grybelinių ligų PGR diagnostika

Pats tiksliausias ir patikimiausias būdas diagnozuoti grybelį ir kt užkrečiamos ligos yra daugialypis grandininis reakcija. Diagnostikos metodas turi šiuos privalumus:

• maža analizės kaina;
• didelis tikslumas;
• greitai atliekami biomedžiagos tyrimai;
• Analizei galite paimti bet kokį audinių mėginį (odos gabalėlį, gleivinę, nuo pėdų padų, pirštų, nagų paviršių, plaukų, kraujo).

Pagrindinis šio tyrimo apribojimas yra siauras dėmesys. Norėdami diagnozuoti mikozę, turite tiksliai žinoti, kur ji paveikė žmogaus kūną. PGR nustato patogeno tipą ir jo koncentraciją paciento organizme. Rezultatai bus žinomi per dieną, kai kuriais atvejais (nesant nepalankioms sąlygoms), atsakymai ateina pristatymo dieną (po 5-6 valandų). Tyrimo greitis priklauso nuo mėginių paėmimo teisingumo, medicinos personalo patirties, laboratorijos darbo krūvio.

Kaip atpažinti grybelį namuose

Sugebėjus atpažinti mikozinių patologijų simptomus ir naudojant namų diagnostikos metodus, galima nustatyti patogeno tipą. Pacientas turi teisingai įvertinti ligos eigą ankstyvose stadijose, grybelinę ligą galima supainioti su žvyneline ar kerpe. Norėdami to išvengti, turite žinoti pagrindinius mikozės požymius, kurie išskiria ją nuo kitų negalavimų. Grybelinės infekcijos simptomai:

• nagai pagelsta ir pradeda luptis;
• nago plokštelės formos pasikeitimas;
• nėra remisijos ir paūmėjimo laikotarpių, prasideda visiškas plokštelės atsiskyrimas, kuris nepasitaiko su odos patologijomis ir psoriaze;
• pažeista vieta nemalonaus kvapo, palietus skauda, ​​niežti, luptis, odos paviršiuje gali susidaryti apnašos;
• Grybelis dažniausiai pažeidžia tarpus tarp pirštų ant vienos ar abiejų pėdų, vėliau liga išplinta į nagą ir likusią pėdos dalį.

Nagų grybelio diagnozė naudojant kalio permanganatą

Jei pastebėjote, kad rankų ir kojų pirštų nagai pradėjo keistis arba atsirado nemalonus kvapas, galite patikrinti, ar nėra infekcijos, ar nėra infekcijos. Jums reikės mangano, šilto vandens ir indo analizei. Procedūra atliekama taip:

• jei yra ženklų odos ligašią vietą patepkite plonu jodo sluoksniu;
• palaukite 2 minutes;
• jei yra problema, pažeidimai įgaus sodrią spalvą;
• sveikos odos vietos nebus paryškintos.

Kiek kainuoja diagnozuoti grybelines ligas Maskvos klinikose?

Vaizdo įrašas

Dėmesio! Straipsnyje pateikta informacija skirta tik informaciniams tikslams. Straipsnyje pateiktos medžiagos neskatina savęs gydyti. Tik kvalifikuotas gydytojas gali nustatyti diagnozę ir pateikti gydymo rekomendacijas, atsižvelgdamas į individualias konkretaus paciento savybes.

Grybų ar mikozių sukeltos ligos yra dažna problema. Yra neįtikėtinai daug patogenų, sukeliančių mikozes.

Kiekvienais metais mokslininkai atranda ir aprašo naujas grybų rūšis. Nepaisant to, mikozių diagnostika ir gydymas yra seniai žinomas ir aiškus mechanizmas.

Grybelinių ligų rūšys

Žmonėms dauguma grybų pažeidžia gleivines ir odą.

Ligos, kurias sukelia grybeliai, yra šios:

• grybelis
• kandidozė
• onichomikozė
• margas arba pityriasis versicolor
• kerpės juodos
• seborėja
• aspergiliozė

Mikozės diagnozavimo metodai

Vienas iš populiariausių metodų yra mikrobiologinė mikozių diagnostika.

Šiuolaikiniai diagnostikos metodai leidžia tiksliai nustatyti, kuris grybelis sukėlė ligą. Ateityje tai leidžia pasirinkti optimalų gydymo kursą. Šiuo metu yra trys pagrindiniai mikozių laboratorinės diagnostikos metodai.

Jie apima:

• mikroskopinis
• kultūrinis
• serologinis

Kiekvienas metodas turi savų privalumų. Kultūrinė mikozių diagnostika leidžia nustatyti grybelio tipą. Tokiu atveju galima įvertinti kolonijų jautrumą įvairiems vaistams.

Šis metodas leis jums pasirinkti veiksmingas vaistas. Šis metodas reikalauja daug laiko sėjai ir kolonijų auginimui.

Mikroskopiniai ir serologiniai mikozių diagnostikos metodai reikalauja mažiau laiko. Juos vartojant, nustatomas ir patogeno tipas, tačiau jo jautrumo vaistams patikrinti neįmanoma. Kai kuriais atvejais galima naudoti liuminescencinį diagnostikos metodą. Šis metodas yra mažiau paplitęs dėl jo sudėtingumo.

Liuminescencinis metodas gali būti naudojamas tik tada, kai plaukai yra paveikti grybelių. Metodas yra neveiksmingas diagnozuojant ankstyvosios stadijos. Taip yra dėl to, kad švytėjimo efektas atsiras tik tuo atveju, jei plaukai bus stipriai pažeisti grybelio.

Pėdos mikozės diagnozė

Pėdos mikozė yra viena iš labiausiai paplitusių dermatomikozių.

Šis terminas paprastai suprantamas kaip grybelinė pėdų ir nagų odos infekcija.

Prisiminti! Liga turi recidyvuojančią eigą.

Diagnozuojant pėdos mikozę, būtina ją atskirti nuo daugelio kitų ligų. Pėdos mikozės diagnozė pagrįsta klinikinės apraiškos ir mikroskopinis tyrimas. Galima naudoti kultūros metodą.

Mikozių gydymas

Pagrindinis vaidmuo gydant mikozes yra priešgrybeliniai vaistai vietinis ir sisteminis veikimas.

Gydymas vietiniais antimikotikais yra nukreiptas tiesiai į ligos šaltinį. Tuo pačiu metu neigiamas poveikis visam organizmui yra minimalus.

Sisteminiai antimikotiniai vaistai skiriami, jei:

• vietiniai priešgrybeliniai vaistai yra neveiksmingi
• liga yra sisteminio pobūdžio

Desensibilizuojantys ir antihistamininiai vaistai skiriami, kai mikozes lydi uždegiminis procesas arba alerginės reakcijos. Jei antrinė infekcija yra susijusi su mikozėmis, gali būti skiriami antibakteriniai vaistai.

Svarbu pradėti gydyti grybelines ligas ankstyvose ligos stadijose. Jei procesas yra senas, gydymas gali užtrukti ilgiau.

Kai atsiranda pirmieji simptomai, nedelsdami kreipkitės pagalbos į mūsų gydytoją.